COLO 320(人結(jié)腸癌細(xì)胞)細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
COLO 320(人結(jié)腸癌細(xì)胞)細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀(guān)察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類(lèi)型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀(guān)察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。
 
Ishikawa(人子宮內(nèi)膜細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

人眼脈絡(luò)黑色素瘤細(xì)胞英文名稱(chēng)：C918

尿素酶發(fā)酵管BR20支國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

Molt-4(人急性淋巴母細(xì)胞白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion

小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞英文名稱(chēng)：raw264.7

堿性蛋白胨水/AP增殖霍亂弧菌及付霍亂弧菌250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

PBS(10X)規(guī)格：500mlgersion

小鼠腎上細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

丙二酸鹽發(fā)酵管BR20支國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

SKOV3/Taxol-25, 人卵巢紫杉醇耐藥細(xì)胞株

Bcap-37(人腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

MFC培養(yǎng)基/MFC Medium飲用水中大腸菌群濾膜法檢驗(yàn)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

YAC-1(小鼠淋巴瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
COLO 320(人結(jié)腸癌細(xì)胞)96次反應(yīng)LightCycler DNA Master HybProbe, 96 reactions

480次反應(yīng)LightCycler DNA Master HybProbe, 480 reactions

96次反應(yīng)LightCycler DNA Master SYBR Green I, 96 reactions

480次反應(yīng)LightCycler DNA Master SYBR Green I, 480 reactions

96次反應(yīng)LightCycler RNA Master HybProbe

96次反應(yīng)LightCycler RNA Master SYBR Green I

96次反應(yīng)LightCycler RNA Amplification Kit HybProbe

96次反應(yīng)LightCycler RNA Amplification Kit SYBR Green I
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